余甘果 （phyllanthusemblicaL.） 又名牛甘果、 余甘子、油甘果、油柑等，為雙子葉植物綱、大 戟科葉下珠屬植物。余甘果喜光，主要分布 在福建、臺(tái)灣、廣東、廣西、貴州、云南等熱 帶、亞熱帶地區(qū)。同時(shí)余甘果適應(yīng)性強(qiáng)，并且 耐干旱，根系發(fā)達(dá)，有利于保持水土，有利于 維護(hù)生態(tài)環(huán)境的正常。對(duì)余甘果的資源保護(hù)、開 發(fā)、研究有著重要的意義。余甘果具有抗衰老、 抗壞血酸、抗腫瘤、降血壓、降血脂等功 效，潤(rùn)肺化痰，生津止渴，增進(jìn)食欲，可治喉炎 和乙肝肝炎功效，能明顯治療和預(yù)防胃癌。 治療咽喉不適、煙酒過度、膽道蛔蟲絞痛等， 更是立竿見影。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)材料為新鮮余甘果，2019 年 7 月中旬采 購(gòu)于廣東省潮州市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，置于 4℃冰箱短期 冷藏。 實(shí)驗(yàn)試劑包括單寧酸、乙醇、丙三醇、鄰二 氮菲、冰醋酸、乙二胺四乙酸二鈉、六合水三氯 化鐵、無水乙酸鈉，均為分析純。 實(shí)驗(yàn)儀器：超聲波清洗儀 （S22H，致微廈門 有限公司）、電子天平 （BSA224S，賽多利斯科學(xué) 儀器有限公司）、恒溫水浴鍋 （XMTD203，金壇 市科析儀器有限公司）、臺(tái)式高效冷凍離心機(jī) （H1850R，湖南湘怡實(shí)驗(yàn)儀器開發(fā)有限公司）、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 （上海精宏DHG-9140A 型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、紫外可見分光光度計(jì) T6 新世紀(jì) （北京普析通用儀器有限公司）、高速多 功能打粉機(jī) （CS-700, 永康市天祺盛世工貿(mào)有限 公司）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密稱取單寧酸 5mg，置于 25 mL 容量瓶中， 用蒸餾水溶解定容，作為 0.1mg/mL 單寧標(biāo)準(zhǔn)溶 液 ， 分 別 取 0μL、 400μL、 800μL、 1200μL、 1600μL、2000μL 單寧標(biāo)準(zhǔn)溶液于 6 個(gè) 25 mL 棕 色容量瓶中，加入 5 mL 蒸餾水和 125μL 的 0.1 mol/L FeCl3 溶液，靜置 20min，再加入 5 mL 鄰二 氮菲緩沖溶液 [ m （0.015mol/L 鄰二氮菲）∶ m （NaAc 緩沖溶液）∶ m（0.05mol/L EDTA） =10∶5∶1] 定容，靜置 10min，在 510nm 處測(cè)定各濃度的吸 光度。以吸光度為縱軸，單寧濃度為橫軸繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線，得 Y=0.2862X+0.0346，R2 =0.9925。每 次測(cè)定提取液獲得吸光度值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程， 再換算成余甘果中單寧含量。

1.2.2 試樣制備

準(zhǔn)確稱量 40 g 余甘果，烘干至恒重再稱量， 得出干重比。稱取 5.0 g 鮮果打碎，以 m （水） ∶ m （甘油） =9∶ 1 作為提取溶劑，提取時(shí)間為 30 min，提取功率為 100 W，多次提取，至溶液顏 色清澈，合并濾液，抽取部分檢測(cè)，通過鄰二 氮菲分光光度法測(cè)定單寧含量。加入 0.1mol/L FeCl3 溶液與樣品液反應(yīng)，再加入鄰二氮菲溶液 反應(yīng)，在 510nm 處用分光光度計(jì)對(duì)反應(yīng)后的溶液 進(jìn)行吸光度檢測(cè)，根據(jù)單寧標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算余甘果 中總單寧含量。

2 單因素試驗(yàn)

2.1 比較不同提取溶劑對(duì)單寧提取率的影響

將余甘果切半處理，以時(shí)間 60 min、溫度為 40℃、功率為 100 W，料液比為 1∶40 （g/mL） 為 提取條件，比較水、乙醇、水+甘油 （4∶6）、乙 醇+甘油 （4∶6） 作為提取溶劑的提取效率。經(jīng)數(shù) 據(jù)處理后，結(jié)果如圖 1 所示。 五種提取溶劑提取率依次為：乙醇+甘油 （13.91%）、水+甘油 （11.83%）、乙醇 （10.25%）、 甘油 （4.63%）、水 （2.31%）。其中，乙醇+甘油 的提取率最高，雖然比水+甘油的提取率高 2.08%，但考慮環(huán)境和成本問題，選擇水+甘油作 為單寧提取劑。通過分析數(shù)據(jù)，可得出，甘油的 加入后，提取率明顯提高。

2.2 水和甘油混合溶劑的配比對(duì)單寧提取率的影響

為優(yōu)選出水和甘油的最佳混合比例對(duì)單寧提 取率的影響。準(zhǔn)確稱取余甘果 14 g，中間切半處 理，以時(shí)間為 60 min，溫度為 40℃、功率為 100 W 作為提取條件，考察甘油與水混合比例分別 為：2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4 對(duì)單寧提取率的影 響，進(jìn)一步確定水和甘油的混合比例對(duì)單寧提取 率的影響。

3 結(jié)果與分析

單寧溶出率隨著提取溫度的 增加而增大，60℃的提取溫度比 40℃的提取溫度 的單寧提取率略大。當(dāng)提取溫度為 60℃時(shí)單寧提 取率最高?？紤]單寧受熱易分解的特點(diǎn)，選擇提 取溫度為 20、40、60℃作為響應(yīng)面考察條件。中的三因素作為響應(yīng) 面優(yōu)化因素，每次試驗(yàn)均重復(fù) 3 次。應(yīng)用 Design Expert 8.0.6 軟件對(duì)響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回歸擬合 分析，可得出單寧得率=16.66-0.71×A-1.26×B+ 0.69×C-0.96×A×B+1.21×A×C+0.070×B×C-1.98× A2-0.99 ×B2+1.16 ×C2 ，公式中：A 為提取溫度 （℃），B 為料液比（g/mL），C 為提取時(shí)間 （min）。

4 結(jié)論與分析

本試驗(yàn)嘗試將單寧提取的方法引用到脫澀工 藝上，并且得到了不錯(cuò)的效果。不僅能將澀味 極重的單寧在簡(jiǎn)便的脫澀工藝下快速的果實(shí)中提 取出來。經(jīng)文件檢索后，此前一般以余甘果粉末 為試驗(yàn)原材料，無法保證果實(shí)完整性。本試驗(yàn)采 用余甘果鮮果進(jìn)行單寧提取，能較大的保留著果 實(shí)的完整性，減少其營(yíng)養(yǎng)成分的流失。而在脫澀 工藝上所運(yùn)用到的甘油是良好的單寧提取溶劑并 且具有價(jià)格低廉、安全無毒等特性。此前，國(guó)內(nèi) 使用甘油作為單寧的提取溶劑提取單寧的文章鮮 有所見。



 

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